Beta galactosidase assay

**1. Definición de Ensayo de Beta Galactosidasa**

| Término | Definición | Fuente |

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| Ensayo de Beta Galactosidasa | Técnica cuantitativa utilizada para medir la actividad de la enzima beta galactosidasa | [1](https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3290463/) |

**2. Principio del Ensayo**

| Principio | Descripción | Fuente |

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**3. Aplicaciones**

| Aplicaciones | Descripción | Fuente |

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| Detección e identificación de bacterias | Diferenciar bacterias que expresan beta galactosidasa, como E. coli | [3](https://www.jove.com/science-education/5385/beta-galactosidase-lac-z-assay) |

| Analizar la expresión génica | Medir la actividad del promotor del gen lacZ | [3](https://www.jove.com/science-education/5385/beta-galactosidase-lac-z-assay) |

| Ensayos celulares | Cuantificar la actividad celular | [4](https://www.bdbiosciences.com/es-es/products/immunocytometry/research-areas/cell-health-and-function/beta-galactosidase-assays) |

**4. Sustratos**

| Sustrato | Estructura | Fuente |

|—|—|—|

| X-gal (5-bromo-4-cloro-3-indolil-beta-D-galactopiranosido) | Sustrato fluorogénico | [5](https://www.sigmaaldrich.com/ES/es/product/sigma/g7012) |

**5. Unidades de Actividad**

| Unidad | Definición | Fuente |

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| Unidad Miller | Cantidad de enzima que cataliza la hidrólisis de 1 nmol de ONPG por minuto a 30°C | [6](https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2586412/) |

| Unidad Internacional (UI) | Cantidad de enzima que cataliza la hidrólisis de 1 µmol de ONPG por minuto a 25°C | [6](https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2586412/) |

**6. Factores que Afectan la Actividad**

| Factor | Efecto | Fuente |

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**7. Ventajas del Ensayo**

| Ventaja | Descripción | Fuente |

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**8. Desventajas del Ensayo**

| Desventaja | Descripción | Fuente |

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**9. Procedimiento General**

| Paso | Descripción | Fuente |

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| Preparación de la muestra | Extraer la enzima de la fuente | [10](https://bioinfo.genotoul.fr/protocols/beta_galactosidase.pdf) |

| Incubación | Incubar la muestra con el sustrato | [10](https://bioinfo.genotoul.fr/protocols/beta_galactosidase.pdf) |

| Medición | Medir la absorbancia o fluorescencia del producto | [10](https://bioinfo.genotoul.fr/protocols/beta_galactosidase.pdf) |

| Cálculo | Calcular la actividad de la enzima utilizando una curva estándar | [10](https://bioinfo.genotoul.fr/protocols/beta_galactosidase.pdf) |

**10. Controles**

| Control | Descripción | Fuente |

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| Blanco | Muestra sin enzima | [11](https://bitesizebio.com/12684/beta-galactosidase-assay/) |

| Positivo | Muestra con actividad de enzima conocida | [11](https://bitesizebio.com/12684/beta-galactosidase-assay/) |

| Inhibición | Muestra con inhibidor de la enzima | [11](https://bitesizebio.com/12684/beta-galactosidase-assay/) |

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